Ученые СФУ научились измерять температуру белков с помощью «метки-шпиона»
Ученые Института инженерной физики и радиоэлектроники и Института фундаментальной биологии и биотехнологий СФУ изучили свойства красителя флуоресцеина, который позволяет измерять некоторые важные параметры белковых молекул, например, температуру и кислотно-щелочной баланс (pH).
Результаты исследования помогут усовершенствовать методы флуоресцентного зондирования поверхности функциональных биомолекул.
С помощью флуоресцентных зондов можно исследовать молекулярные механизмы возникновения и развития патологических процессов, действие на организм биологически активных веществ и лекарственных препаратов. Такие зонды применяются для диагностики и прогноза развития различных заболеваний.
«Флуоресцеин — органический краситель, который даёт интенсивное зелёное свечение после поглощения света. Это излучение можно использовать не только для визуализации бесцветных структур, но и для анализа собственного окружения красителя.
Структура флуорофора предполагает возможность существования набора ионных форм с различными зарядами.
-Чувствительность спектральных характеристик, поглощения и излучения, свидетельствует об изменении равновесия между формами, которое можно связать температурой или ионным составом среды. Таким образом, краситель становится индикатором для выяснения некоторых характеристик в нанометровом масштабе», — рассказала доктор физико-математических наук, профессор базовой кафедры фотоники и лазерных технологий СФУ Евгения Слюсарева.
Учёные СФУ создали математическую модель того, как условия возбуждения, термодинамические факторы и ионный состав среды изменяют ионную форму красителя, и как это влияет на свечение — флуоресценцию.
«Флуоресцеин, а также его производный ФИТЦ используются в биомедицинских исследованиях, чтобы поставить метку на белки и другие макромолекулы. Для этого такой „светлячок“ „прикрепляют“ в нужное место путём ковалентного „пришивания“. Таким образом флуорофор можно использовать как „метку-шпиона“, помогающего отследить нужные параметры внутри живой клетки, никак не нарушая её жизнедеятельность», — отметила аспирант Сибирского федерального университета Дарья Суржикова.
Исследователь подчеркнула, что в университете впервые был выполнен анализ механизмов, лежащих в основе температурных закономерностей флуоресценции красителя. А главное, учёные СФУ научились «расшифровать» излучение флуоресцеина, чтобы узнавать, какую именно информацию о своём окружении передает этот нано-«шпион».